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生物選修一知識(shí)點(diǎn)總結(jié)
一,、傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)
1.果酒制作：
1)原理：酵母菌的無氧呼吸反應(yīng)式：C6H12O62C2H5OH+2CO2+能量,。
2)菌種來源：附著在葡萄皮上的野生酵母菌或人工培養(yǎng)的酵母菌。
3)條件：18-25℃,，密封,，每隔一段時(shí)間放氣(CO2)
4)檢測(cè)：在酸性條件下，重鉻酸鉀與酒精反應(yīng)呈灰綠色,。
2,、果醋制作：
1)原理：醋酸菌的有氧呼吸。
O2,，糖源充足時(shí),，將糖分解成醋酸
O2充足，缺少糖源時(shí),，將乙醇變?yōu)橐胰?，再變?yōu)榇姿帷?/p>
C2H5OH+O2CH3COOH+H2O
2)條件：30-35℃，適時(shí)通入無菌空氣,。
3,、腐乳制作：
1)菌種：青霉、酵母,、曲霉,、毛霉等，主要是毛霉(都是真菌),。
2)原理：毛霉產(chǎn)生的蛋白酶將豆腐中的蛋白質(zhì)分解成小分子的肽和aa;脂肪酶將脂肪水解為甘油和脂肪酸,。
3)條件：15-18℃，保持一定的濕度,。
4)菌種來源：空氣中的毛霉孢子或優(yōu)良毛霉菌種直接接種,。
5)加鹽腌制時(shí)要逐層加鹽，隨層數(shù)加高而增加鹽量,，鹽能抑制微生物的生長(zhǎng),，避免豆腐塊腐敗變質(zhì)。
4,、泡菜制作：
1)原理：乳酸菌的無氧呼吸,，反應(yīng)式：C6H12O62C3H6O3+能量
2)制作過程：①將清水與鹽按質(zhì)量比4：1配制成鹽水，將鹽水煮沸冷卻,。煮沸是為了殺滅雜菌,，冷卻之后使用是為了保證乳酸菌等微生物的生命活動(dòng)不受影響。②將新鮮蔬菜放入鹽水中后,，蓋好壇蓋,。向壇蓋邊沿的水槽中注滿水,，以保證乳酸菌發(fā)酵的無氧環(huán)境。
3)亞硝酸鹽含量的測(cè)定：
①方法：比色法;
②原理：在鹽酸酸化條件下,，亞硝酸鹽與對(duì)氨基苯磺酸發(fā)生重氮化反應(yīng)后,，與N-1-萘基乙二胺鹽酸鹽結(jié)合形成玫瑰紅色染料。
二,、微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用
1,、培養(yǎng)基的種類：按物理性質(zhì)分為固體培養(yǎng)基和液體培養(yǎng)基，按化學(xué)成分分為合成培養(yǎng)基和天然培養(yǎng)基,，按用途分為選擇培養(yǎng)基和鑒別培養(yǎng)基。
2,、培養(yǎng)基的成分一般都含有水,、碳源、氮源,、無機(jī)鹽P14
3,、微生物在固體培養(yǎng)基表面生長(zhǎng)，可以形成肉眼可見的菌落,。
4,、培養(yǎng)基還需滿足微生物對(duì)PH、特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)以及O2的要求,。
5,、獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止外來雜菌的入侵。
6,、常用滅菌方法有：灼燒滅菌,，將接種工具如接種環(huán)、接種針滅菌;干熱滅菌：如玻璃器皿,、金屬用具等需保持干燥的物品,。高壓蒸汽滅菌：如培養(yǎng)基的滅菌。
7,、用固體培養(yǎng)基對(duì)大腸桿菌純化培養(yǎng),，可分為兩步：制備培養(yǎng)基和純化大腸桿菌。
8,、固體培養(yǎng)基的制備：計(jì)算→稱量→溶化→滅菌→倒平板
9,、微生物常用的接種方法：平板劃線法和稀釋涂布平板法。
10,、平板劃線法是通過連續(xù)劃線,，將菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基表面，稀釋涂布平板法是將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋,，分別涂布到培養(yǎng)基表面,。當(dāng)它們稀釋到一定程度后,，微生物將分散成單個(gè)細(xì)胞，從而在培養(yǎng)基上形成單個(gè)菌落,。
11,、微生物的計(jì)數(shù)方法：活菌計(jì)數(shù)法、顯微鏡直接計(jì)數(shù)法,、濾膜法,。
12、活菌計(jì)數(shù)法就是當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí),，培養(yǎng)基表面生長(zhǎng)的一個(gè)菌落,，來源于樣品稀釋液中的一個(gè)活菌。通過統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù),，就能推測(cè)出樣品中大約含有多少個(gè)活菌,。統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)目低。因?yàn)楫?dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí),，平板上觀察的只是一個(gè)菌落,。
13、顯微鏡直接計(jì)數(shù)也是測(cè)定微生物數(shù)量的常用方法,，但它包括了死亡的微生物,。
14、設(shè)置對(duì)照的主要目的是排除實(shí)驗(yàn)組中非測(cè)試因素對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響,。提高實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可信度,。①如何證明培養(yǎng)基是否受到污染：實(shí)驗(yàn)組的培養(yǎng)基中接種要培養(yǎng)的微生物，對(duì)照組中的培養(yǎng)基接種等量的蒸餾水(設(shè)置空白對(duì)照),。②如何證明某選擇培養(yǎng)基是否有選擇功能：實(shí)驗(yàn)組中的培養(yǎng)基用該選擇培養(yǎng)基,，對(duì)照組中培養(yǎng)基用普通培養(yǎng)基(牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基)。如果普通培養(yǎng)基的菌落數(shù)明顯大于選擇培養(yǎng)基中的數(shù)目,，則說明該選擇培養(yǎng)基有選擇功能,。
15、如何分離分解尿素的細(xì)菌?培養(yǎng)基中以尿素為唯一氮源,，加入酚紅指示劑,，如果PH升高，指示劑變紅,，可初步鑒定該菌能分解尿素,。
16、如何分離分解纖維素的微生物?以纖維素為唯一碳源的培養(yǎng)基,。
17,、纖維素酶是一種復(fù)合酶，至少包括三組分：C1酶,、CX酶和葡萄糖苷酶,。前兩種酶使纖維素分解成纖維二糖,，第三種酶將纖維二糖分解成葡萄糖。
18,、篩選纖維素分解菌的方法：剛果紅染色法,，其原理是剛果紅可以與像纖維素這樣的多糖物質(zhì)形成紅色復(fù)合物，但并不和水解后的纖維二糖和葡萄糖發(fā)生這種反應(yīng),。當(dāng)纖維素被纖維素酶分解后,，剛果紅—纖維素的復(fù)合物無法形成，培養(yǎng)基中會(huì)出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈,。(產(chǎn)生了透明圈,，說明纖維素被分解了，說明有纖維素分解菌)
三,、植物組織培養(yǎng)
1,、菊花組織培養(yǎng)一般選擇未開花植株的莖上部新萌生的側(cè)枝。
2,、常用的培養(yǎng)基是MS培養(yǎng)基：主要成分包括：大量元素：N、P,、K,、Ca、Mg,、S;微量元素：B,、Mn、Cu,、Zn,、Fe、Mo,、I,、Co;有機(jī)物：如甘氨酸、煙酸,、肌醇,、維生素以及蔗糖等，常常還要添加植物激素,。
3,、生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素是啟動(dòng)細(xì)胞分裂、脫分化和再分化的關(guān)鍵激素,。
1)按照不同的順序使用,，會(huì)得到不同的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
①先使用生長(zhǎng)素,，后使用細(xì)胞分裂素：有利于細(xì)胞分裂,，但細(xì)胞不分化;
②先使用細(xì)胞分裂素,，后使用生長(zhǎng)素：細(xì)胞既分裂也分化。
③同時(shí)使用：分化頻率提高,。
4,、花粉是單倍體的生殖細(xì)胞，花粉的發(fā)育要經(jīng)歷小孢子四分體時(shí)期,，單核期和雙核期等階段,。
5、通過花藥培養(yǎng)產(chǎn)生花粉植株(單倍體植株)一般有兩種途徑,，究竟是哪種途徑主要取決于培養(yǎng)基中激素的種類及其濃度配比,。
6、影響花藥培養(yǎng)的因素：材料的選擇和培養(yǎng)基的組成,，此外,，親本植株的生長(zhǎng)條件、材料的低溫預(yù)處理以及接種密度等都有影響,。
7,、月季的花藥培養(yǎng)一般選初花期，并且選擇單核期的花粉,。選擇花藥時(shí),，一般通過鏡檢來確定花粉是否處于適宜的發(fā)育期。確定花粉發(fā)育時(shí)期的常用方法：醋酸洋紅法,，某些植物的花粉細(xì)胞核不易著色,，需采用焙花青——鉻礬法，這種方法能將花粉細(xì)胞核染成藍(lán)黑色,。
四,、酶的研究與應(yīng)用
1、果膠酶作用：分解果膠,，瓦解植物的細(xì)胞壁及胞間層,，提高水果的出汁率，并使果汁變得澄清,。
2,、果膠酶并不特指某一種酶，包括多聚半乳糖醛酸酶,、果膠分解酶和果膠酯酶等,。
3、酶的活性可用單位時(shí)間內(nèi),、單位體積中反應(yīng)物的減少量或產(chǎn)物的增加量來表示,。
4、目前常用的酶制劑有四類：蛋白酶、脂肪酶,、淀粉酶和纖維素酶,，其中應(yīng)用最廣泛、效果最明顯的是堿性蛋白酶和堿性脂肪酶,。
5,、加酶洗衣粉的作用原理：堿性蛋白酶能將血漬、奶漬等含有的大分子蛋白質(zhì)水解成可溶性的氨基酸或小分子的肽,，使污跡容易從衣物上脫落,。同樣道理，脂肪酶,、淀粉酶和纖維素酶也能將大分子的脂肪,、淀粉和纖維素水解為小分子物質(zhì)。
6,、固定化技術(shù)包括：包埋法,、化學(xué)結(jié)合法和物理吸附法。一般來說,，酶更適合采用化學(xué)結(jié)合法和物理吸附法固定化,，而細(xì)胞多采用包埋法固定化。因?yàn)榧?xì)胞個(gè)大,，而酶分子很小;個(gè)大的細(xì)胞難以被吸附或結(jié)合,，而個(gè)小的酶容易從包埋材料中漏出。
7,、固定化酵母細(xì)胞時(shí)，酵母細(xì)胞的活化用蒸餾水;配制海藻酸鈉溶液時(shí),，加熱要用小火,，或者間斷加熱;要將海藻酸鈉溶液冷卻至室溫，再加入活化的酵母細(xì)胞,。CaCl2溶液有利于凝膠珠形成穩(wěn)定的結(jié)構(gòu),。
五、DNA和蛋白質(zhì)技術(shù)
1,、提取生物大分子的基本思路是選用一定的物理或化學(xué)方法分離具有不同物理或化學(xué)性質(zhì)的生物大分子,。
2、DNA溶解性：①DNA在不同濃度的NaCL溶液中溶解度不同,。在0.14moL/L的NaCL溶液中,，溶解度最小。②DNA不溶于酒精,。
3,、DNA對(duì)酶、高溫和洗滌劑的耐受性：因?yàn)槊赣袑Ｒ恍裕鞍酌改芩獾鞍踪|(zhì),，但對(duì)DNA沒有影響,。DNA比較能耐高溫。洗滌劑能夠瓦解細(xì)胞膜,，但對(duì)DNA無影響,。
4、在沸水浴條件下,，DNA遇二苯胺會(huì)被染成藍(lán)色,。
5、提取DNA的材料一般用雞血而不用豬血,，因?yàn)椴溉閯?dòng)物(豬)成熟的紅細(xì)胞無細(xì)胞核,，無DNA。
6,、破碎雞血細(xì)胞時(shí),，可以加入一定量的蒸餾水，同時(shí)用玻璃棒攪拌,，過濾后收集濾液即可,。
7、為了純化提取的DNA,，需要將濾液進(jìn)一步處理,。在濾液中加入NaCL，使其濃度為2mol/L,，過濾除去不溶的雜質(zhì),，再加入蒸餾水，使NaCL濃度為0.14mol/L,，析出DNA,，過濾除去溶液中的雜質(zhì)。
8,、向溶解了DNA的NaCL溶液中加入體積分?jǐn)?shù)為95%的冷卻的酒精溶液,，目的是提取含雜質(zhì)更少的DNA。
9,、PCR原理：DNA體外復(fù)制
10,、PCR的條件：①一定的緩沖溶液;②DNA模板;③分別與兩條模板鏈相結(jié)合的兩種引物;④四種脫氧核苷酸;⑤耐熱的DNA聚合酶;⑥控制溫度的儀器設(shè)備。
11,、為什么要引物?因?yàn)镈NA聚合酶不能從頭開始合成DNA,，而只能從3′端延伸DNA鏈。DNA的合成方向總是從子鏈的5′端向3′端延伸,。
12,、PCR三步驟：變性,、復(fù)性和延伸。在PCR循環(huán)之前,，常要進(jìn)行一次預(yù)變性,，以便增加大分子模板DNA徹底變性的概率。
13,、PCR的結(jié)果：特異地復(fù)制處于兩個(gè)引物之間的DNA序列,，使這段固定長(zhǎng)度的序列呈指數(shù)擴(kuò)增。
14,、DNA在260nm的紫外線波段有一強(qiáng)烈的吸收峰,。
15、蛋白質(zhì)分離的方法：凝膠色譜法和電泳,。
16,、凝膠色譜法是根據(jù)相對(duì)分子質(zhì)量的大小分離蛋白質(zhì)的有效方法。相對(duì)分子質(zhì)量較小的蛋白質(zhì),，移動(dòng)速度慢,，后洗脫出來;相對(duì)分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)，移動(dòng)速度快,，先洗脫出來,。
17、電泳利用了待分離樣品中各種分子帶電性質(zhì)的差異以及分子本身的大小形狀的不同,，使帶電分子產(chǎn)生不同的遷移速度,，從而實(shí)現(xiàn)各種分子的分離。
六,、植物有效成分的提取
1,、植物芳香油的提取方法：蒸餾、壓榨和萃取,。
2,、水蒸汽蒸餾法是利用水蒸汽將揮發(fā)性較強(qiáng)的植物芳香油攜帶出來，形成油水混合物,，冷卻后又重新分出油層和水層。如玫瑰油,、薄荷油等(也可用萃取法),。
3、柑橘,、檸檬芳香油的制備常使用壓榨法,，因?yàn)樗姓麴s會(huì)導(dǎo)致原料焦糊和有效成分水解。
4,、胡蘿卜素的提取一般用萃取法,。萃取法是將粉碎、干燥的植物原料用有機(jī)溶劑浸泡，使芳香油溶解在有機(jī)溶劑中,，然后蒸發(fā)出有機(jī)溶劑,，獲取純凈的植物芳香油。
5,、石油醚具有較高的沸點(diǎn),，能充分溶解胡蘿卜素，并且不與水混溶,，所以適宜用作胡蘿卜素的萃取劑。
6、玫瑰精油的化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定,，難溶于水,，易溶于有機(jī)溶劑，能隨水蒸汽一同蒸餾,。故適用于蒸餾法,。
7、玫瑰精油的油水混合物中加入NaCL目的是增加水層密度,，使油水分層,。分離油層后加無水Na2SO4，目的是除去水,，再過濾去除Na2SO4,。
8、橘皮壓榨前用石灰水浸泡,，目的是破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu),、分解果膠、防止橘皮壓榨時(shí)滑脫,，提高出油率,。
9、胡蘿卜素是橘黃色結(jié)晶,，化學(xué)性質(zhì)比較穩(wěn)定,，不溶于水，微溶于乙醇,，易溶于石油醚等有機(jī)溶劑,，所以適于用萃取法。
10,、萃取時(shí)采用水浴加熱,，以防有機(jī)溶劑燃燒、爆炸,。瓶口安裝回流冷凝裝置,，以防止加熱時(shí)有機(jī)溶劑揮發(fā),。
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