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蛋白質(zhì)等電點(diǎn)實(shí)驗(yàn)結(jié)果 蛋白質(zhì)等電點(diǎn)測(cè)定實(shí)驗(yàn)討論篇一
為規(guī)范公司水、電,、辦公用品的使用,,確保辦公所需,,倡導(dǎo)勤儉節(jié)約,、物盡其用、杜絕鋪張浪費(fèi),、大手大腳,,管好用好辦公物品,特制定本制度,。
一,、節(jié)約用水
1、自然用水將龍頭盡量開小,,用完隨手關(guān)閉,,堅(jiān)決避免“長(zhǎng)流水”現(xiàn)象發(fā)生。
2,、飲用水量身倒水,,杜絕“剩半杯”現(xiàn)象,給顧客倒水以六七分為宜,,喝完再續(xù),。飲水機(jī)一經(jīng)發(fā)現(xiàn)漏水等損壞情況立即保修。
二,、節(jié)約用電
1,、強(qiáng)化照明系統(tǒng)節(jié)電。辦公時(shí)間要充分利用自然光照,,在陽(yáng)光充足,、室內(nèi)光線好的情況下不開燈,,長(zhǎng)時(shí)間離開辦公室或下班時(shí)要做到人走燈滅。
2,、注重用電設(shè)備節(jié)電,。各部門人員使用電腦、傳真機(jī),、復(fù)印機(jī)等辦公自動(dòng)化設(shè)備時(shí),,盡量減少開啟和使用次數(shù),長(zhǎng)時(shí)間不使用或下班后要徹底切斷電源,,減少辦公設(shè)備待機(jī)能耗,。
3、辦公室,、會(huì)議室等辦公區(qū)域做到無(wú)人時(shí)不開空調(diào),,開空調(diào)時(shí)不開門窗。
三,、節(jié)約辦公用品(規(guī)定中的辦公用品分為固定資產(chǎn)和一般辦公用品)
1,、固定資產(chǎn)主要指:桌椅、公文柜,、電腦,、電話機(jī)、打印機(jī),、飲水機(jī),、車輛等。
2,、一般辦公用品包括剪刀,、膠帶、橡皮擦,、回形針,、直尺、訂書器,、涂改液,、裁紙刀、筆,、信箋,、筆記本,、打印紙,、復(fù)印紙,、復(fù)寫紙、印泥,、釘書針,、大頭針,、夾子、名片,、賬冊(cè),、卷宗、檔案袋(盒),、標(biāo)簽,、紙杯、計(jì)算器,、電池等,。
3、節(jié)約用紙,。公司鼓勵(lì)員工盡量雙面打印紙張,,一面留白廢紙應(yīng)作草稿使用。
4,、公司員工請(qǐng)自帶飲水杯具,,一般情況下禁止使用一次性紙杯。
5,、盡量減少電話的通話時(shí)間,,盡量長(zhǎng)話短說(shuō);禁止私人電話與辦公電話捆綁,;禁止在辦公場(chǎng)所用辦公電話聊天,。
6,、節(jié)約辦公用品,。保管和使用好自己的辦公用品,申領(lǐng)有度,。對(duì)辦公電器要注意保管和維修,,長(zhǎng)時(shí)間不用應(yīng)切斷電源,降低折舊,。
7,、辦公用品應(yīng)為辦公所用,不得據(jù)為己有,,不得移作他用或私用,。
8、所有員工要勤儉節(jié)約,,杜絕浪費(fèi),,不許將辦公用品隨意丟棄廢置,努力降低消耗和辦公費(fèi)用,,精心使用辦公設(shè)備,。
蛋白質(zhì)等電點(diǎn)實(shí)驗(yàn)結(jié)果 蛋白質(zhì)等電點(diǎn)測(cè)定實(shí)驗(yàn)討論篇二
電剪刀的操作規(guī)程及保養(yǎng)
1,、上班前檢查油窗機(jī)油是否正常,磨刀裝緊,,輪部注入1-2滴機(jī)油,;
2、操作工除對(duì)機(jī)器進(jìn)行必要的保養(yǎng)外,,不得隨意拆卸,,必須保持機(jī)器完整;
3,、操作時(shí)必須佩帶專用的鋼絲手套,;
4、下班前必須清掃機(jī)器灰塵,;
5,、嚴(yán)禁他人隨意操作。
放布機(jī)操作規(guī)程
1,、上班前先檢查機(jī)器各部分是否正常,,并加注潤(rùn)滑油;
2,、各傳動(dòng)部位不準(zhǔn)有布條等纏繞物,,發(fā)現(xiàn)有異物應(yīng)及時(shí)消除;
3,、中途離崗必須關(guān)掉電源,;
4、下班前切斷電源,,清理檢查灰塵方可下班,。
粘合機(jī)的操作規(guī)程
1、檢查各部位是否正常,,輸送帶內(nèi)是否有雜物,,輸送帶是否清潔;
2,、開啟總電源,,開啟輸送電源前,先把調(diào)速開關(guān)低于低速位,,然后根據(jù)技術(shù)要求把速度調(diào)至適當(dāng)速度,,開啟加溫調(diào)節(jié)器,把溫度調(diào)至所需溫度,;
3,、開機(jī)前把壓力調(diào)至最低,當(dāng)溫度達(dá)到溫度后,,把壓力加至規(guī)定壓力,,開始工作,,操作中經(jīng)常注意輸送帶調(diào)編工作是否正常,嚴(yán)禁有產(chǎn)品卷入輸送帶內(nèi),;
4,、根據(jù)技術(shù)和檢驗(yàn)要求,必要時(shí)對(duì)產(chǎn)品進(jìn)行檢驗(yàn)和實(shí)驗(yàn),,確認(rèn)粘合結(jié)果合格后進(jìn)行批量生產(chǎn),;
5、生產(chǎn)過(guò)程中必須保持輸送帶清潔,,生產(chǎn)途中停電必須及時(shí)用手柄把產(chǎn)品從輸送帶中搖出,,并使輸送帶運(yùn)動(dòng)一定時(shí)期進(jìn)行冷卻;
6,、生產(chǎn)結(jié)束先停止加溫,,把壓力調(diào)至最低,使輸送帶繼續(xù)工作一定時(shí)間至輸送帶冷卻后,,對(duì)輸送帶進(jìn)行清潔保養(yǎng)后,,切斷電源加上機(jī)罩。
精裁機(jī)的操作規(guī)程及保養(yǎng)
1,、上班前先檢查機(jī)器各部分是否正常,,并加注潤(rùn)滑油;
2,、操作時(shí)必須佩帶規(guī)定的專用手套,;
3、清掃機(jī)器必須切斷電源后進(jìn)行,;
4,、下班前必須關(guān)掉電源,并把機(jī)器罩好,;
5,、嚴(yán)禁操作工任意串崗操作。
電鉆的操作規(guī)程及保養(yǎng)
1,、上班前檢查電鉆有無(wú)異常響聲;
2,、操作工不得任意拆卸零部件,,必須保持機(jī)器完整;
3,、下班前必須清掃機(jī)器衛(wèi)生,,電源切斷后方可下班;
4,、嚴(yán)禁他人隨意操作,。
電加熱裁布機(jī)的操作規(guī)程及保養(yǎng)
1,、上班前檢查機(jī)器各部位是否正常,并對(duì)機(jī)器進(jìn)行必要的清潔,;
2,、在操作過(guò)程中發(fā)現(xiàn)異常應(yīng)及時(shí)關(guān)機(jī)檢查,自己不能解決的請(qǐng)機(jī)修工檢查,,確認(rèn)正常后方可繼續(xù)操作,;
3、中途離崗必須關(guān)掉電源,,更換電熱絲必須在關(guān)機(jī)的狀態(tài)進(jìn)行,;
4、嚴(yán)禁他人操作,。
氣泵的使用及保養(yǎng)
1,、上班前必須排掉冷凝水,并檢查油窗機(jī)油是否正常,;
2,、開機(jī)后檢查聲音有無(wú)異常,檢查壓力表是否標(biāo)準(zhǔn),;
3,、下班前必須關(guān)掉電源,清理灰塵,;
4,、嚴(yán)禁他人操作。
大燙熨斗的使用及保養(yǎng)
1,、上班前打開蒸汽進(jìn)出閥門,,并排出積水;
2,、工作中發(fā)現(xiàn)異常應(yīng)立即關(guān)掉進(jìn)出閥門檢查,;
3、下班前將熨斗放在指定位置,;
4,、嚴(yán)禁他人隨意操作。
燙臺(tái)的使用和保養(yǎng)
1,、上班前打開電源檢查吸風(fēng)電機(jī)有無(wú)異常響聲,;
2、檢查燙臺(tái)布是否完好,;
3,、下班前關(guān)閉電源并清理臺(tái)面衛(wèi)生;
4、嚴(yán)禁串崗操作,。
大白扣使用及保養(yǎng)
1,、上班前先檢查機(jī)器各部分是否正常,并加入潤(rùn)滑油,;
2,、檢查保險(xiǎn)裝置是否正常,使用前空踩機(jī)器檢查,;
3,、下班前必須清掃機(jī)器衛(wèi)生,電源切斷后方可下班,;
4,、嚴(yán)禁他人隨意操作。
蛋白質(zhì)等電點(diǎn)實(shí)驗(yàn)結(jié)果 蛋白質(zhì)等電點(diǎn)測(cè)定實(shí)驗(yàn)討論篇三
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等電點(diǎn)聚焦測(cè)蛋白質(zhì)等電點(diǎn) 1.了解蛋白質(zhì)的兩性解離性質(zhì)和等電點(diǎn)聚焦的原理,; 2.學(xué)習(xí)測(cè)定蛋白質(zhì)等電點(diǎn)的方法并掌握?qǐng)A盤電泳技術(shù),。
二.實(shí)驗(yàn)原理 等電點(diǎn)聚焦(ief)是在電場(chǎng)中分離蛋白質(zhì)技術(shù)的一個(gè)重要發(fā)展,ief 實(shí)質(zhì) 就是在穩(wěn)定的 ph 梯度中按等電點(diǎn)的不同分離兩性大分子的平衡電泳方法,。
在電場(chǎng)中充有兩性載體和抗對(duì)流介質(zhì),,當(dāng)加上電場(chǎng)后,由于兩性載體移動(dòng)的 結(jié)果,,在兩極之間逐步建立起穩(wěn)定的 ph 梯度,,當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)分子或其它兩性分子存 在于這樣的 ph 梯度中時(shí),這種分子便會(huì)由于其表面電荷在此電場(chǎng)中運(yùn)動(dòng),,并最 終到達(dá)一個(gè)使其表面靜電荷為 0 的區(qū)帶,,這時(shí)的 ph 則是這種分子的 pl。聚焦在 等電點(diǎn)的分子也會(huì)不斷地?cái)U(kuò)散,。一旦偏離其等電點(diǎn)后,,由于 ph 環(huán)境的改變,分 子又立即得到正電荷或負(fù)電荷,,從而又向 pl 遷移,。因此,這些分子總是處于不 斷地?cái)U(kuò)散和抗擴(kuò)散的平衡之中,,在 pl 處得以“聚焦”,。
三.實(shí)驗(yàn)步驟 1.凝膠制備 按表 1 的比例配制 4ml 工作膠液,在真空干燥器中抽氣 10min,。每組 4 管,,每管 加膠液 1.8ml?;靹蚝罅⒓醋⑷氲揭褱?zhǔn)備好的凝膠管中,膠液加至離管頂部 1cm 處,在膠面上再覆蓋 3mm 厚的水層,,應(yīng)注意不要讓水破壞膠的表面,,室溫下放置 20?30min 即可聚合。
表 1 凝膠工作液配比 凝膠母液(丙烯酰胺 30%甲叉雙丙烯 酰胺 0.8%)
1ml 10%±硫酸銨 0.02ml 水 2.68ml 載體兩性電解液 0.15ml 蛋白樣品液 0.1ml,0.05ml temed 0.02ml 2.電泳 吸去凝膠柱表面上的水層,,將凝膠管垂直固定于圓盤電泳槽中,。于電泳槽下槽加 入0.2 %的 500ml 硫酸作正極;上槽加入 0.5 %的 800ml 乙醇胺作負(fù)極打開電源,,/ 4
將電壓恒定為 300v,因?yàn)榫劢惯^(guò)程是電阻不斷加大的過(guò)程,,故聚焦電泳過(guò)程中,電流將不斷下降,,降至穩(wěn)定時(shí),,即表明聚焦已完成,繼續(xù)電泳約 30min 后,,停止 電泳,,全程約需 3h。
3.剝膠
電泳結(jié)束后,,取下凝膠管,,用水洗去膠管兩端的電極液,按照柱狀電泳剝膠的方 法取出膠條,,以膠條的正極為“頭”,,負(fù)極為“尾”,正極端呈酸性,,負(fù)極端呈堿 性,。剝離后,量出并記錄凝膠的長(zhǎng)度,。4.固定
取其中的凝膠條 3 根置于一個(gè)小培養(yǎng)皿內(nèi),,倒入 10%放在三氯乙酸固定液中固定,約半小時(shí)后,,即可看到膠條內(nèi)蛋白質(zhì)的白色沉淀帶,。固定完畢,倒出固定液用直 尺量出膠條長(zhǎng)度 l i 和正極端到蛋白質(zhì)白色沉淀帶中心,,即聚焦部位的長(zhǎng)度 l 2 o 梯度的測(cè)量 切段法:將未經(jīng)固定的 1 根膠條,,按照從正極端(酸性端)到負(fù)極端(堿性端)的順 序切成相等的 10 段,按次放人有標(biāo)號(hào)的,、裝有 0.0im 氯化鉀的試管中,,浸泡過(guò) 夜。然后用 ph 計(jì)測(cè)出每管浸泡液的 ph 并記錄,。
四?實(shí)驗(yàn)結(jié)果 1.凝膠條的長(zhǎng)度及染色蛋白帶的位置 凝膠條編號(hào) 1 2 3 4 固定前的長(zhǎng)度 7.8cm 7.8cm 7.4cm 7.7cm l o
固定后的長(zhǎng)度 7.7cm 7.8cm 7.4cm 未染色,,測(cè) ph l 1
梯度 蛋白帶距酸端 1.3cm 1.4cm 1.3cm
距離 l 2
蛋白質(zhì)距正極 1.32cm 1.4cm 1.3cm
實(shí)際長(zhǎng)度 l s
梯度表及其相應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)曲線 標(biāo)號(hào) 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 長(zhǎng)度 /cm 0.77 0.77 0.77 0.77 0.77 0.77 0.77 0.77 0.77 0.77 ph 值 3.05 3.72 5.04 6.76 7.24 7.99 8.62 9.58 10.1 4 10.1 8 / 4
蛋白質(zhì)樣品等電點(diǎn)的計(jì)算:
蛋白質(zhì)聚焦部位距凝膠條正極端的實(shí)際長(zhǎng)度 =固定后的蛋白區(qū)帶中心距凝膠條正 極端的距離*固定前凝膠條長(zhǎng)度/固定后凝膠條長(zhǎng)度 則將上述數(shù)據(jù)代入 l f l 2 *
-l o,求出蛋白質(zhì)距正極實(shí)際長(zhǎng)度 l s 分別為 1.3cm、1.4cm,、l i
1.3cm
o 由凝膠條 1,、2 和 3 及其相應(yīng)蛋白帶距離可計(jì)算出蛋白帶距酸端的平均距 離:(1.3+1.4+1.32)/3=1.34 ②計(jì)算出蛋白質(zhì)聚焦部位距凝膠條正極端的實(shí)際長(zhǎng)度后,直接從 ph 梯度曲線上 求出該蛋白質(zhì)等電點(diǎn),。得出其標(biāo)準(zhǔn)公式為:y = 0.8372x + 2.6273 則待測(cè)蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)為 0.8372*1.34+2.6273=3.75 五?實(shí)驗(yàn)分析及討論(1)實(shí)驗(yàn)結(jié)果測(cè)得的樣品蛋白的等電點(diǎn)為 3.75,,通過(guò)查常見蛋白質(zhì)等電點(diǎn)參 考值表格可知,其為 b-卵黃脂磷蛋白,。由于記錄凝膠長(zhǎng)度及蛋白質(zhì)距正極的距 離存在讀數(shù)誤差,,所以也可能是伴花生球蛋白(3.7-5.0)o(2)
等電點(diǎn)聚焦測(cè)蛋白質(zhì)等電點(diǎn)分辨率高,可將等電點(diǎn)相差 0.01 — 0.02ph 單位 的蛋白質(zhì)分開,。不像一般電泳易受擴(kuò)散作用影響,,使區(qū)帶越走越寬;聚焦電泳則 能抵消擴(kuò)散作用,,使區(qū)帶越走越窄,。同時(shí),很稀的樣品也可以聚焦而濃縮,,實(shí)驗(yàn) 操作起來(lái)也簡(jiǎn)單方便,。
(3)其存在其不足之處是在實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程當(dāng)中,讀數(shù)的取值,、樣品溶液是否含 鹽,、在等電點(diǎn)時(shí)蛋白質(zhì)是否溶解或變性,都會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果,。因?yàn)辂}會(huì)增大電流 量,,產(chǎn)生熱量;鹽分子移至兩極時(shí),,將產(chǎn)生酸或堿,,中和兩性電解質(zhì)。由于這些 影響因素的存在,,個(gè)人認(rèn)為利用這一種方法還不足以鑒定出蛋白質(zhì)種類,。/ 4
附 常見蛋白質(zhì)等電點(diǎn)參考值
第電點(diǎn) 實(shí) m 質(zhì) sffe
xs 神召 w 蘭[izhlprido 12.1 血 虹星自百人)[l beoo
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ejobulm] 4 岳巴蘭霽曰 lk?tstem] e s-43 ¥ ■粘蛋當(dāng)[¥-cwn] 1s3—441 驗(yàn)亙匿% [“血呈凹]-fi.b-5_2 口-卵清植雖宣[
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